ABSTRACT
The present study had the aim of testing the hexane and methanol extracts of avocado seeds, in order to determine their toxicity towards Artemia salina, evaluate their larvicidal activity towards Aedes aegypti and investigate their in vitro antifungal potential against strains of Candida spp, Cryptococcus neoformans and Malassezia pachydermatis through the microdilution technique. In toxicity tests on Artemia salina, the hexane and methanol extracts from avocado seeds showed LC50 values of 2.37 and 24.13mg mL-1 respectively. Against Aedes aegypti larvae, the LC50 results obtained were 16.7mg mL-1 for hexane extract and 8.87mg mL-1 for methanol extract from avocado seeds. The extracts tested were also active against all the yeast strains tested in vitro, with differing results such that the minimum inhibitory concentration of the hexane extract ranged from 0.625 to 1.25mg L-¹, from 0.312 to 0.625mg mL-1 and from 0.031 to 0.625mg mL-1, for the strains of Candida spp, Cryptococcus neoformans and Malassezia pachydermatis, respectively. The minimal inhibitory concentration for the methanol extract ranged from 0.125 to 0.625mg mL-1, from 0.08 to 0.156mg mL-1 and from 0.312 to 0.625mg mL-1, for the strains of Candida spp., Cryptococcus neoformans and Malassezia pachydermatis, respectively.
O presente estudo teve como objetivo testar os extratos hexânico e metanólico das sementes do abacate, a fim de determinar sua toxicidade em Artemia salina, avaliar a atividade larvicida frente ao Aedes aegypti, bem como verificar o potencial antifúngico in vitro contra cepas de Candida spp, Cryptococcus neoformans e Malassezia pachydermatis, através da técnica de microdiluição. Os extratos hexânico e metanólico das sementes de abacate apresentaram no teste de toxicidade frente à Artemia salina, valores de LC50 2,37 e 24,13mg L-1, respectivamente; contra as larvas do Aedes aegypti os resultados obtidos foram LC50 16,7mg L-1 para o extrato hexânico e 8,87mg L-1 para o extrato metanólico das sementes do abacate. Os extratos testados também foram ativos contra todas as cepas de leveduras, testadas in vitro, apresentando diferentes resultados, onde o MIC do extrato hexânico variou de 0,625 a 1,25mg mL-1, de 0,312 a 0,625mg mL-1 e de 0,031 a 0,625mg mL-1 para as cepas de Candida spp., Cryptococcus neoformans e Malassezia pachydermatis, respectivamente. O intervalo de MIC para o extrato metanólico foi de 0,125 a 0,625mg mL-1, 0,08 a 0,156mg mL-1 e de 0,312 a 0,625mg mL-1, para as exemplares de Candida spp., Cryptococcus neoformans e Malassezia pachydermatis, respectivamente.
Subject(s)
Animals , Aedes/drug effects , Antifungal Agents/pharmacology , Artemia/drug effects , Mitosporic Fungi/drug effects , Persea/chemistry , Antifungal Agents/chemistry , Antifungal Agents/toxicity , Candida/drug effects , Cryptococcus neoformans/drug effects , Larva/drug effects , Microbial Sensitivity Tests , Malassezia/drug effects , Seeds/chemistry , Seeds/toxicityABSTRACT
A protein fraction, rich in lectin, obtained from the red seaweed Hypnea musciformis by precipitation with ammonium sulfate (F40/70) was screened for chitinase and beta-1,3-glucanase activity and assessed for antifungal potential against the human pathogen yeasts Candida albicans and C. guilliermondii. The F40/70 fraction showed chitinase and beta-1,3-glucanase enzymes, with specific activities of 276.43 and 1880.7 Units.mg -1 protein, respectively. It was capable of inhibiting the growth of C. guilliermondii at the concentrations of 45, 100 and 450 æg protein.ml -1 but it showed only a discrete inhibition against C. albicans irrespective of the tested concentrations. The inhibitory action was shown to be fungistatic and the presence of the glycoprotein fetuin, for which the lectin in the fraction had affinity, abolished the antifungal action. The complete growth recovery following fetuin treatment indicated that chitinase and beta-1,3-glucanase were not involved in the growth inhibition of these yeasts.
Uma fração protéica, rica em lectina, obtida por precipitação com sulfato de amônia (F40/70), da alga marinha vermelha Hypnea musciformis foi avaliada quanto à presença de atividade quitinásica e beta-1,3-glucanásica e potencial antifúngico contra as leveduras patogênicas Candida albicans e C. guilliermondii. A fração F40/70 mostrou ambas as atividades enzimáticas, com atividades específicas de 276,43 e 1880,7 Unidades.mg-1 proteína, respectivamente. Essa fração foi capaz de inibir de forma significativa o crescimento da levedura C. guilliermondii nas concentrações de 45, 100 e 450 æg proteína.ml -1 porém mostrou apenas uma discreta ação contra C. albicans, independente das concentrações testadas. A ação inibitória foi fungistática e a presença da glicoproteína fetuína, para a qual a lectina na fração tem afinidade, aboliu a ação antifúngica. A recuperação completa do crescimento das leveduras após tratamento com fetuína indicou que as atividades quitinásica e beta-1,3-glucanásica não estão envolvidas na inibição do crescimento dessas leveduras.
ABSTRACT
A manutenção de culturas de Malassezia pachydermatis em micotecas é importante para estudos retrospectivos e prospectivos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de Malassezia pachydermatis frente a diferentes métodos de conservação de culturas. Para tanto, após o processo de identificação, essa levedura foi estocada, por seis e nove meses, em salina e salina com óleo mineral a 28ºC, bem como, em ágar Dixon, ágar Dixon acrescido de glicerol e ágar Dixon acrescido de dimetil-sulfóxido (DMSO) a -20ºC. Os meios de Dixon e Dixon acrescido de glicerol foram os métodos mais adequados (p< 0,05) para manter a viabilidade das cepas, em seis e nove meses de estoque. Qualquer dos métodos utilizados foi conveniente para manutenção da positividade na prova da urease em seis meses de estocagem, sendo o ágar Dixon e o ágar Dixon acrescido de glicerol, os melhores (p< 0,05) para nove meses. Portanto, para a recuperação e manutenção das características de Malassezia pachydermatis, recomenda-se o emprego do meio de Dixon ou do meio de Dixon acrescido de glicerol.